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公 司:西安交大保賽生物技術股份有限公司
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6B瓊脂糖微球    

6B
瓊脂糖微球(Bio-Sep 6B)
產品說明書
  6B瓊脂糖微球是用6%濃度瓊脂糖制備成的球型顆粒,作為凝膠層析介質使用。
  1. 外觀
  本品為乳白色球狀凝膠,無嗅、無味、無肉眼可見雜質。
  2. 理化指標
項      目
指      標
基   質
6%瓊脂糖凝膠
排阻極限
10000~4×106 (球蛋白)
形狀
球形
粒徑
 50~160μm
最高流速
14 cm/h*
耐壓
0.02 MPa
耐熱
pH7水中50℃24h
pH適用范圍
3~11(短時間,在位清洗),4~9 (長時間)
化學穩定性
可耐8mol/L尿素、6mol/L鹽酸胍
  *檢測條件: 層析柱10mm×300mm  *柱床高15cm,25℃, 流動相為0.1mol/LNaCl
  3. 包裝
  產品以聚胺酯瓶密封包裝,外貼標簽,注明“品名、體積、顆粒大小、保質期、批號、生產日期、生產單位及地址” 等內容。
  4. 貯存
  產品應密封貯存在4℃~25℃(保存溶液為20% 乙醇),通風、干燥、清潔的地方。不能冷凍。
  用過的柱子貯存在4℃(20% 乙醇)。
  5. 注意事項
  本品應避免與氧化劑接觸,避免長時間暴露在空氣中
  6.運輸
  運輸中應避免日曬、雨淋、重壓,嚴禁與有毒、有害物品混運。
  7.保質期
  暫定5年。
  8.應用
  本產品為傳統的瓊脂糖介質,非特異性吸附低,回收率高,可多次重復使用等特點,用于分子量差異大、對分辨率要求不高的樣品的凝膠色譜純化。下面簡要介紹介質的使用過程。
  8.1 裝柱
  凝膠過濾介質的使用對裝柱的要求較高,為了保證分離效果,一般通過柱子上加一個裝柱器來使分離柱裝滿凝膠,或采用帶有軸向加壓裝置的柱子。凝膠柱床一般高于60cm。裝柱效果可用染料或丙酮-水溶液進行檢驗。
  以下過程為通用介質裝填過程。若為帶有軸向加壓裝置的柱子,可在柱床穩定后將柱床壓緊,接好管路。
  ⑴讓所有的材料和試劑達到室溫。配制緩沖液。凝膠層析上樣、平衡和洗脫只用一種低鹽濃度的緩沖液。
  ⑵選擇一根一定直徑的柱子,長約30~60cm,根據柱子大小取所需量的凝膠(約為柱床體積的1.15倍),清洗掉20%乙醇,抽干,用緩沖液(按凝膠:緩沖液=3:1的比例)配成勻漿。勻漿作脫氣處理。不要劇烈攪動,以免攪壞微球。
  ⑶將柱內及柱子底端用水或緩沖液潤濕并保持一小段液位(液面略高于濾膜),務必使底端無氣泡。
  ⑷用玻璃棒引導勻漿沿著柱內壁一次性倒入柱內,注意勿使產生氣泡。打開柱子出液口,使凝膠在柱內自由沉降,連結好柱子頂端柱頭。
  ⑸ 打開蠕動泵,讓緩沖液緩慢流過,使柱床穩定。用緩沖液平衡柱子,到柱床穩定。
  ⑹最好用一個裝柱器輔助裝柱。裝完后柱床上端輕輕刮平,上好柱頭。
  8.2平衡
  讓緩沖液以一定流速流過柱子,到流出液電導和pH不變。
  8.3上樣
  ⑴樣品用緩沖液配制,渾濁的樣品要離心和過濾后上樣。含鹽量過大、濃度過小的樣品要先做處理,再上樣。
  ⑵介質對樣品組分的分離是按組分分子量大小進行的,分子量大的先流出來。
  ⑶上樣體積約為柱體積的1~2%,越小分離越好。
  8.4洗脫
  用緩沖液洗脫,洗脫中保持流速、緩沖液組成不變。
  8.5再生
  一般用緩沖液洗到平衡,可再次使用。
  8.6注意:在裝柱、使用和保存柱子的時候,始終要避免柱子流干氣泡進入。
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